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B27无血清培养基的主要补充因子

发布时间: 2019-04-26  点击次数: 1815次
B27无血清培养基在使用无血清培养基时,有些细胞需要逐渐适应,即先将原来的培养基与无血清培养基混合培养,渐渐地再转为完全的无血清培养基培养。有些贴壁生长的细胞,复苏时也可用少量的血清先培养,因为血清可助细胞贴壁,然后再换成无血清培养基。
 
B27无血清培养基的主要补充因子
补充因子是代替血清的各种因子的总称。多数无血清培养液必须补加3-8种因子。胰岛素、亚硒酸钠和转铁蛋白是必须补充因子,其他多数为辅助作用的因子。按其功能不同,补充因子可分为五类:
 
激素和生长因子。很多细胞用无血清培养时需要加入激素,如胰岛素、生长激素、胰高糖素等。胰岛素是重要的细胞存活因子,与细胞上的胰岛素受体结合后可促进RNA、蛋白质和脂肪酸的合成,抑制细胞凋亡。此外,雌二醇、孕酮、氢化可的松等也是无血清培养基中常添加的补充因子。
 
结合蛋白。常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。转铁蛋白与细胞上的转铁蛋白受体结合是细胞获取铁元素的主要来源。白蛋白与脂类、激素、维生素、金属离子和生长因子结合后可调节上述物质在B27无血清培养基中活性的作用,此外,由于牛血清白蛋白一般添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。
 
贴壁因子。许多细胞必须贴壁才能生长,这种情况下B27无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤粘连蛋白、胶原蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤粘连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞、CHO细胞等。
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